北京市食品藥品監(jiān)督管理局關(guān)于發(fā)布《體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點(diǎn)指南（2017年修訂版）》的通告

  為增強(qiáng)本市醫(yī)療器械監(jiān)管人員對醫(yī)療器械生產(chǎn)關(guān)鍵環(huán)節(jié)的認(rèn)知和把握，指導(dǎo)全市醫(yī)療器械監(jiān)管人員開展監(jiān)督檢查工作，同時，為醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)開展管理工作提供參考，根據(jù)本市生產(chǎn)企業(yè)現(xiàn)狀和監(jiān)督管理工作的實(shí)際情況，北京市食品藥品監(jiān)督管理局對《體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點(diǎn)指南（2013版）》進(jìn)行了修訂，編制了《體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點(diǎn)指南（2017年修訂版）》，現(xiàn)予發(fā)布。

  特此通告。

  

  附件：體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點(diǎn)指南

  北京市食品藥品監(jiān)督管理局

  2017年11月7日

附件

體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點(diǎn)指南

（2017年修訂版）

按照醫(yī)療器械管理的體外診斷試劑是一類特殊的產(chǎn)品，包括可單獨(dú)使用或與儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)組合使用，在疾病的預(yù)測、預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測、預(yù)后觀察和健康狀態(tài)評價(jià)的過程中，用于對人體樣本（各種體液、細(xì)胞、組織樣本等）進(jìn)行體外檢測的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）等。其研制、生產(chǎn)、檢驗(yàn)等過程的控制能力直接影響著產(chǎn)品的質(zhì)量。

本指南是對國家食品藥品監(jiān)督管理總局2015年發(fā)布實(shí)施的《醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范附錄體外診斷試劑》中重點(diǎn)檢查條款的解釋和說明，并歸納明確了體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量管理體系中重點(diǎn)環(huán)節(jié)的審查要求，旨在幫助北京市醫(yī)療器械監(jiān)管人員對體外診斷試劑產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理體系的認(rèn)知和掌握，可作為北京市食品藥品監(jiān)督管理局組織、實(shí)施醫(yī)療器械注冊質(zhì)量管理體系現(xiàn)場核查、《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》現(xiàn)場核查、醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)督檢查等各類檢查的參考資料。幫助北京市醫(yī)療器械監(jiān)管人員增強(qiáng)對體外診斷試劑生產(chǎn)管理體系的了解和掌握，提高全市醫(yī)療器械監(jiān)管人員對體外診斷試劑的監(jiān)督檢查水平。同時，為醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)開展體外診斷試劑生產(chǎn)管理活動提供參考。

當(dāng)國家相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、監(jiān)管要求發(fā)生變化時，應(yīng)當(dāng)重新修訂以確保本指南持續(xù)符合要求。

一、人員管理要求

（一）體外診斷試劑生產(chǎn)、技術(shù)和質(zhì)量管理人員應(yīng)當(dāng)具有醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)或藥學(xué)等與所生產(chǎn)產(chǎn)品相關(guān)的專業(yè)知識，并具有相應(yīng)的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，以確保具備在生產(chǎn)、質(zhì)量管理中履行職責(zé)的能力。生產(chǎn)負(fù)責(zé)人和質(zhì)量負(fù)責(zé)人不得互相兼任。

與醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)或藥學(xué)等相關(guān)的專業(yè)包括：醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)、生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、血液學(xué)、微生物學(xué)等。

（二）從事生產(chǎn)操作和檢驗(yàn)的人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過崗前專門培訓(xùn)，培訓(xùn)記錄應(yīng)當(dāng)涉及本崗位工作的操作規(guī)程，可采用口試、筆試或?qū)嵅俚姆绞剑⒈Ａ襞嘤?xùn)記錄。凡在潔凈室（區(qū)）工作的人員應(yīng)當(dāng)定期進(jìn)行衛(wèi)生和微生物學(xué)基礎(chǔ)知識、潔凈作業(yè)等方面培訓(xùn)。臨時進(jìn)入潔凈室（區(qū)）的人員，應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)行指導(dǎo)和監(jiān)督。從事體外診斷試劑生產(chǎn)的全體人員，包括清潔、維修等人員均應(yīng)當(dāng)根據(jù)其產(chǎn)品和所從事的生產(chǎn)操作進(jìn)行專業(yè)和安全防護(hù)培訓(xùn)。從事體外診斷試劑的檢驗(yàn)人員應(yīng)當(dāng)具有醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)或藥學(xué)等與所生產(chǎn)產(chǎn)品相關(guān)的專業(yè)背景或從事該專業(yè)工作經(jīng)歷，考核合格后由企業(yè)任命方可上崗。企業(yè)還應(yīng)當(dāng)配備專職成品檢驗(yàn)員。

（三）對生產(chǎn)高生物活性、高毒性、強(qiáng)傳染性、強(qiáng)致敏性等有特殊要求產(chǎn)品的企業(yè)，應(yīng)當(dāng)建立人員花名冊，對生產(chǎn)和質(zhì)量檢驗(yàn)的人員應(yīng)當(dāng)進(jìn)行登記，并重點(diǎn)對《危險(xiǎn)化學(xué)品安全管理?xiàng)l例》、《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》等法規(guī)進(jìn)行培訓(xùn)，保存相關(guān)培訓(xùn)記錄。

（四）應(yīng)當(dāng)建立對人員的清潔要求、健康要求和服裝要求，人員進(jìn)入潔凈室（區(qū)）應(yīng)當(dāng)按照程序進(jìn)行凈化，并穿戴工作帽、口罩、潔凈工作服、工作鞋。裸手接觸產(chǎn)品的操作人員每隔一定時間應(yīng)當(dāng)對手再次進(jìn)行消毒。裸手消毒劑的種類應(yīng)當(dāng)定期更換。直接接觸物料和產(chǎn)品的操作人員每年至少體檢一次，并建立人員健康檔案?；加袀魅拘院透腥拘约膊〉娜藛T不得從事直接接觸產(chǎn)品的工作。工作服及其質(zhì)量應(yīng)當(dāng)與生產(chǎn)操作的要求及操作區(qū)的潔凈度級別相適應(yīng)，其式樣和穿著方式應(yīng)當(dāng)能夠滿足保護(hù)產(chǎn)品和人員的要求。潔凈工作服和無菌工作服不得脫落纖維和顆粒性物質(zhì)，無菌工作服應(yīng)當(dāng)能夠包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。

二、生產(chǎn)環(huán)境與設(shè)施設(shè)備控制要求

（一）應(yīng)當(dāng)有整潔的生產(chǎn)環(huán)境。廠區(qū)的地面、路面周圍環(huán)境及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對產(chǎn)品的生產(chǎn)造成污染。行政區(qū)、生活區(qū)和輔助區(qū)的總體布局合理，不得對生產(chǎn)區(qū)有不良影響。廠區(qū)應(yīng)當(dāng)遠(yuǎn)離有污染的空氣和水等污染源的區(qū)域。

（二）生產(chǎn)廠房應(yīng)當(dāng)設(shè)置防塵、防止昆蟲和其他動物進(jìn)入的設(shè)施。潔凈室（區(qū)）的門、窗及安全門應(yīng)當(dāng)密閉，潔凈室（區(qū)）的門應(yīng)當(dāng)向潔凈度高的方向開啟。

（三）應(yīng)當(dāng)根據(jù)體外診斷試劑的生產(chǎn)過程控制，確定在相應(yīng)級別的潔凈室（區(qū)）內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)的過程，避免生產(chǎn)中的污染?？諝鉂崈艏墑e不同的潔凈室（區(qū)）之間的靜壓差應(yīng)當(dāng)大于5帕，潔凈室（區(qū)）與室外大氣的靜壓差應(yīng)當(dāng)大于10帕，并應(yīng)當(dāng)有指示壓差的裝置。相同級別潔凈室間的壓差梯度應(yīng)當(dāng)合理。

（四）潔凈室（區(qū)）應(yīng)當(dāng)按照體外診斷試劑的生產(chǎn)工藝流程及所要求的空氣潔凈度級別進(jìn)行合理布局，人流、物流走向應(yīng)當(dāng)合理。同一潔凈室（區(qū)）內(nèi)或相鄰潔凈室（區(qū)）間的生產(chǎn)操作不得互相交叉污染。

（五）在同一潔凈室（區(qū)）內(nèi)生產(chǎn)不同品種產(chǎn)品時應(yīng)當(dāng)做到有效隔離，以避免相互混淆和污染。有數(shù)條包裝線同時進(jìn)行生產(chǎn)時，企業(yè)應(yīng)當(dāng)采取隔離或其他有效防止混淆的措施。

（六）企業(yè)應(yīng)當(dāng)確定工藝所需的空氣凈化級別，其生產(chǎn)環(huán)境潔凈度應(yīng)當(dāng)滿足以下要求：

1．陰性或陽性血清、質(zhì)?；蜓褐破返鹊奶幚聿僮?，生產(chǎn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)不低于10，000級潔凈度級別，并應(yīng)當(dāng)與相鄰區(qū)域保持相對負(fù)壓。

2．酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑、免疫熒光試劑、免疫發(fā)光試劑、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑、金標(biāo)試劑、干化學(xué)法試劑、細(xì)胞培養(yǎng)基、校準(zhǔn)品與質(zhì)控品、酶類、抗原、抗體和其他活性類組分的配制及分裝等產(chǎn)品的配液、包被、分裝、點(diǎn)膜、干燥、切割、貼膜以及內(nèi)包裝等，生產(chǎn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)不低于100,000級潔凈度級別。無菌物料等分裝處理操作，操作區(qū)域應(yīng)當(dāng)符合局部100級潔凈度級別。

3．對生產(chǎn)環(huán)境沒有空氣凈化要求的體外診斷試劑，如普通化學(xué)類診斷試劑，應(yīng)當(dāng)在清潔環(huán)境內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。清潔條件的基本要求：要有防塵、通風(fēng)、防止昆蟲或其他動物以及異物混入等措施；人流、物流分開，人員進(jìn)入生產(chǎn)車間前應(yīng)當(dāng)有換鞋、更衣、佩戴口罩和帽子、洗手、手消毒等清潔措施；生產(chǎn)場地的地面應(yīng)當(dāng)便于清潔，墻、頂部應(yīng)當(dāng)平整、光滑，無顆粒物脫落；操作臺應(yīng)當(dāng)光滑、平整、無縫隙、耐腐蝕，便于清洗、消毒；應(yīng)當(dāng)對生產(chǎn)區(qū)域進(jìn)行定期清潔、清洗和消毒；應(yīng)當(dāng)根據(jù)生產(chǎn)要求對生產(chǎn)車間的溫濕度進(jìn)行控制。

普通化學(xué)類試劑一般包括不含生物活性物質(zhì)的生化試劑，如無機(jī)離子測定試劑盒、白蛋白測定試劑盒（BCG法）、總膽固醇測定試劑盒（COD-CE-PAP法）等；電解質(zhì)分析儀隨機(jī)試劑、生化分析儀用稀釋液等；溶血劑等。

（七）根據(jù)工藝規(guī)程等文件，應(yīng)當(dāng)明確潔凈室(區(qū)) 溫濕度的要求、監(jiān)測頻次和記錄的要求，溫濕度監(jiān)測裝置應(yīng)當(dāng)處于正常的工作狀態(tài)，并有檢定標(biāo)識；空調(diào)機(jī)組應(yīng)當(dāng)有溫濕度控制設(shè)施。潔凈室（區(qū)）內(nèi)的溫度、相對濕度應(yīng)當(dāng)符合醫(yī)療器械相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求。對空氣有干燥要求的操作間，應(yīng)當(dāng)配置空氣干燥設(shè)備，保證物料不會受潮變質(zhì)，干燥間濕度一般為10％～30％，生物活性原料一般要求儲存于-15℃以下。有特殊要求的，根據(jù)特殊要求儲存或按照原料廠家規(guī)定執(zhí)行。

（八）生產(chǎn)激素類、操作有致病性病原體或芽胞菌制品的，應(yīng)當(dāng)使用單獨(dú)的空氣凈化系統(tǒng)，與相鄰區(qū)域保持負(fù)壓，排出的空氣不能循環(huán)使用。已知現(xiàn)有的激素類試劑名錄可參考2013版體外診斷試劑分類子目錄“Ⅱ-3 用于激素檢測的試劑”。

（九）對特殊的高致病性病原體的采集、制備，應(yīng)當(dāng)按照《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》等相關(guān)規(guī)定，具備P3級實(shí)驗(yàn)室等相應(yīng)設(shè)施。P3級實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)取得中國合格評定國家認(rèn)可委員會頒發(fā)的證書。特殊的高致病性病原體可參見《人間傳染的病原微生物名錄》。

（十）生產(chǎn)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑的，其生產(chǎn)和檢驗(yàn)應(yīng)當(dāng)在獨(dú)立的建筑物或空間內(nèi)，保證空氣不直接聯(lián)通，防止擴(kuò)增時形成的氣溶膠造成交叉污染。生產(chǎn)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑的，其生產(chǎn)和質(zhì)檢的器具不得混用，用后應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格清洗和消毒。

陽性質(zhì)粒的生產(chǎn)一般分為菌液培養(yǎng)、質(zhì)粒提取、稀釋分裝等過程，要求稀釋分裝應(yīng)當(dāng)有防止氣溶膠污染的措施。

（十一）與試劑直接接觸的設(shè)備和器具應(yīng)當(dāng)易于清潔和保養(yǎng)、不與成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或吸附作用，不會對試劑造成污染。應(yīng)當(dāng)對與產(chǎn)品直接接觸的設(shè)備和器具予以驗(yàn)證，并保存記錄。

1．與試劑直接接觸的設(shè)備一般包括：包被機(jī)、封閉機(jī)、灌裝機(jī)、蠕動泵、洗板機(jī)、攪拌器、切條機(jī)、點(diǎn)膜機(jī)等。

2．與試劑直接接觸的器具一般包括：塑料桶，量筒，燒杯，錐形瓶、玻璃瓶等。

3．常見的體外診斷試劑生產(chǎn)、檢驗(yàn)設(shè)備清單詳見附件1。

（十二）動物室應(yīng)當(dāng)在隔離良好的建筑體內(nèi)，與生產(chǎn)、質(zhì)檢區(qū)分開，不得對生產(chǎn)造成污染。

三、物料采購控制要求

（一）應(yīng)當(dāng)確定外購、外協(xié)物料清單，應(yīng)當(dāng)至少包含以下信息：名稱、規(guī)格型號、分類等級，并明確所有物料的技術(shù)指標(biāo)和質(zhì)量要求。外購、外協(xié)物料清單應(yīng)當(dāng)包含包材、標(biāo)簽和檢驗(yàn)中的耗材（質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、培養(yǎng)基等）；物料清單中應(yīng)當(dāng)包括申報(bào)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中所列的原料。有特殊要求的物料應(yīng)當(dāng)根據(jù)國家相關(guān)法規(guī)要求進(jìn)行采購和進(jìn)貨檢驗(yàn)，如氰化鉀、疊氮鈉等。

（二）外購的標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、生產(chǎn)用或質(zhì)控用血液的采購應(yīng)當(dāng)滿足可追溯要求。應(yīng)當(dāng)由企業(yè)或提供機(jī)構(gòu)測定病原微生物及明確定值范圍；應(yīng)當(dāng)對其來源地、定值范圍、滅活狀態(tài)、數(shù)量、保存、使用狀態(tài)等信息有明確記錄，并由專人負(fù)責(zé)。

校準(zhǔn)品：其值在一個校準(zhǔn)函數(shù)中用作獨(dú)立變量的參考物質(zhì)。應(yīng)當(dāng)具有定值和已知的測量不確定度，其目的應(yīng)當(dāng)是校準(zhǔn)某一測量系統(tǒng)，從而建立此系統(tǒng)測量結(jié)果的計(jì)量學(xué)溯源性。

質(zhì)控品：用于體外診斷的質(zhì)量控制物質(zhì)，是一種旨在用于醫(yī)學(xué)檢測系統(tǒng)中使用的物質(zhì)、材料等，其目的是評價(jià)或驗(yàn)證測量精密度或由于試劑或分析儀器的變化導(dǎo)致的分析偏差等。用于能力驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制等。

（三）應(yīng)當(dāng)明確各類物料的倉儲環(huán)境和控制要求，并定期監(jiān)測，提供環(huán)境監(jiān)測的記錄。倉儲現(xiàn)場的環(huán)境監(jiān)測設(shè)施應(yīng)當(dāng)定期計(jì)量、校準(zhǔn)；應(yīng)當(dāng)具有校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和生物活性物質(zhì)等需要低溫保存的倉庫（如有），需要冷藏、冷凍儲存的原料、半成品和成品，應(yīng)當(dāng)配備相應(yīng)的冷藏、冷凍儲存設(shè)備，并按規(guī)定監(jiān)測設(shè)備運(yùn)行狀況、記錄儲存溫度。冷藏冷凍條件溫度計(jì)量裝置的量程應(yīng)當(dāng)符合要求。冷藏、冷凍體外診斷試劑應(yīng)當(dāng)配備符合其溫度要求的運(yùn)輸設(shè)施設(shè)備。

（四）應(yīng)當(dāng)按照物料的性狀和儲存要求進(jìn)行分類存放管理，應(yīng)當(dāng)明確規(guī)定中間品的儲存條件和期限。所有物料的名稱、批號、有效期和檢驗(yàn)狀態(tài)等標(biāo)識必須明確?？臻g區(qū)域劃分應(yīng)能識別檢驗(yàn)狀態(tài)，如檢驗(yàn)區(qū)、合格品區(qū)等。物料應(yīng)當(dāng)在規(guī)定的使用期限內(nèi)，按照先進(jìn)先出的原則使用。無規(guī)定使用期限的，應(yīng)當(dāng)根據(jù)物料的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)確定儲存期限。一般情況下，物料無規(guī)定使用期限的，其儲存期限一般不超過三年，規(guī)定有效期的，遵其規(guī)定。企業(yè)應(yīng)當(dāng)依據(jù)物料性質(zhì)確定復(fù)驗(yàn)周期，儲存期內(nèi)發(fā)現(xiàn)儲存條件變化且可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時，應(yīng)當(dāng)及時進(jìn)行復(fù)驗(yàn)。已被取樣的包裝應(yīng)當(dāng)有取樣標(biāo)記。應(yīng)當(dāng)對檢測用外購標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶后中間品的儲存條件及有效期進(jìn)行驗(yàn)證。

（五）易燃、易爆、有毒、有害、具有污染性或傳染性、具有生物活性或來源于生物體的物料的存放應(yīng)當(dāng)符合《危險(xiǎn)化學(xué)品安全管理?xiàng)l例》、《生物制品生產(chǎn)、檢定用菌種、毒種管理規(guī)程》、《人間傳染的病原微生物名錄》、《常用危險(xiǎn)化學(xué)品的分類及標(biāo)志》、《危險(xiǎn)貨物品名錄》、《危險(xiǎn)化學(xué)品目錄》、《麻醉品和精神藥品名錄》等相關(guān)國家規(guī)定，應(yīng)當(dāng)做到專區(qū)存放并有明顯的識別標(biāo)識，應(yīng)當(dāng)由專門人員負(fù)責(zé)保管和發(fā)放，在受控條件下進(jìn)行處理，避免造成傳染、污染或泄漏等，發(fā)放后剩余物料應(yīng)當(dāng)妥善保管。

（六）生產(chǎn)過程中所涉及的化學(xué)、生物及其它危險(xiǎn)品，企業(yè)應(yīng)當(dāng)列出清單，并制定相應(yīng)的防護(hù)規(guī)程，其環(huán)境、設(shè)施與設(shè)備應(yīng)當(dāng)符合國家相關(guān)安全規(guī)定。生產(chǎn)過程中涉及的化學(xué)、生物及其它危險(xiǎn)品一般包括：甲醇、無水乙醇、硫酸、鹽酸、三氯硝基甲烷、高錳酸鉀、甲醛、病毒菌種等。

（七）具有污染性、傳染性的物料、高風(fēng)險(xiǎn)的生物活性物料的病原體物料的管理應(yīng)當(dāng)符合國家相關(guān)規(guī)定。專區(qū)存放、專人保管和發(fā)放，并制定相應(yīng)的防護(hù)規(guī)程。

（八）高生物活性、高毒性、強(qiáng)傳染性、強(qiáng)致敏性產(chǎn)品可參照《危險(xiǎn)貨物品名錄》。生物活性是指能引起細(xì)胞正常機(jī)理發(fā)生改變的能力，主要指一些基因表達(dá)產(chǎn)物如具有酶活的抑癌基因表達(dá)蛋白；還有一些激素類物質(zhì)如性激素。高致敏性物質(zhì)是指能引起個體強(qiáng)烈過敏反應(yīng)的物質(zhì)如青霉素、鏈霉素、花粉等。

應(yīng)當(dāng)明確該類物料的使用管理的要求，物料的領(lǐng)取和操作應(yīng)當(dāng)在受控條件下進(jìn)行，不應(yīng)造成傳染、污染或泄漏等。物料操作應(yīng)當(dāng)在單獨(dú)的凈化間進(jìn)行，高風(fēng)險(xiǎn)的生物活性物料操作間應(yīng)當(dāng)與相鄰區(qū)域保持負(fù)壓，排出的空氣不能循環(huán)使用，高風(fēng)險(xiǎn)生物活性物料操作間內(nèi)應(yīng)當(dāng)設(shè)有生物安全柜，空氣應(yīng)當(dāng)進(jìn)行除菌過濾方可排出。

應(yīng)當(dāng)能證明生產(chǎn)或檢驗(yàn)用人血清/血漿的來源，明確使用目的，與供方簽訂技術(shù)協(xié)議。應(yīng)當(dāng)由企業(yè)或醫(yī)療機(jī)構(gòu)測定病原微生物及明確定值范圍。應(yīng)當(dāng)對其來源地、定值區(qū)間、滅活狀態(tài)、數(shù)量、保存、使用狀態(tài)等信息有明確記錄，并由專人負(fù)責(zé)，確保物料的質(zhì)量和穩(wěn)定性。外購的商品化質(zhì)控物應(yīng)當(dāng)能溯源，人血清/血漿原則上應(yīng)當(dāng)提供乙肝、丙肝、艾滋、梅毒陰性報(bào)告。應(yīng)當(dāng)對生產(chǎn)用需要滅活的血清或血漿建立滅活處理的操作規(guī)程，并按照操作規(guī)程的要求，對生產(chǎn)用滅活前后的血清或血漿狀態(tài)進(jìn)行明顯的區(qū)分和標(biāo)識。應(yīng)當(dāng)有對陽性血清的防護(hù)措施，如滅活記錄、不得直接用手接觸等。

（九）應(yīng)當(dāng)明確生產(chǎn)檢驗(yàn)過程中所產(chǎn)生廢物、廢液的種類，對于有毒、有污染的廢液、廢物應(yīng)當(dāng)有完備的回收與無害化處理措施，并保留回收處理的記錄。如采取委托方式，應(yīng)當(dāng)與受托方簽訂委托協(xié)議，并保存相關(guān)記錄。符合相關(guān)的環(huán)保要求。

生產(chǎn)檢驗(yàn)過程中所產(chǎn)生廢物、廢液一般包括：口罩、手套、槍頭、反應(yīng)完成的酶標(biāo)板、實(shí)驗(yàn)完畢培養(yǎng)基、洗板機(jī)廢液桶內(nèi)液體，試劑盒剩余液體、微生物無菌檢查廢液以及陽性等傳染性物料等。

（十）不同性狀和儲存要求的物料應(yīng)當(dāng)進(jìn)行分類存放，按效期管理。應(yīng)當(dāng)建立復(fù)驗(yàn)制度。應(yīng)當(dāng)制定倉儲與運(yùn)輸管理制度，應(yīng)當(dāng)有不同性狀和儲存要求的物料的分類要求；復(fù)驗(yàn)制度應(yīng)當(dāng)明確復(fù)驗(yàn)時機(jī)及復(fù)驗(yàn)方法。冷藏、冷凍的物料應(yīng)當(dāng)分類分開存放，并標(biāo)明有效期。

1．復(fù)驗(yàn)：指超過自定效期的物料繼續(xù)使用前應(yīng)當(dāng)檢驗(yàn)。

2．物料管理制度應(yīng)當(dāng)有對校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的存放管理。

四、生產(chǎn)過程控制要求

（一）應(yīng)當(dāng)按照國家批準(zhǔn)的工藝進(jìn)行生產(chǎn)，應(yīng)當(dāng)制定生產(chǎn)所需的工序流程、工藝文件和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，明確關(guān)鍵工序或特殊工序，確定質(zhì)量控制點(diǎn)，并規(guī)定應(yīng)當(dāng)形成的生產(chǎn)記錄。

本指南主要例舉了幾種常見的體外診斷試劑產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流程，見附件2～5。例舉這幾種產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程是為了更直接的體現(xiàn)不同試劑產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的異同，并不代表作為企業(yè)生產(chǎn)產(chǎn)品的依據(jù)。企業(yè)應(yīng)當(dāng)結(jié)合自己的實(shí)際情況，制訂相應(yīng)產(chǎn)品的工藝流程及質(zhì)量要求。

（二）當(dāng)生產(chǎn)工藝變更足以影響產(chǎn)品安全性、穩(wěn)定性時，應(yīng)當(dāng)重新申報(bào)變更生產(chǎn)工藝，并按程序進(jìn)行工藝修訂。

（三）應(yīng)當(dāng)對每批產(chǎn)品中關(guān)鍵物料進(jìn)行物料平衡核查。如有顯著差異，必須查明原因，在得出合理解釋，確認(rèn)無潛在質(zhì)量事故后，方可按正常產(chǎn)品處理。

物料平衡計(jì)算公式為：

實(shí)際產(chǎn)出量（合格+不合格+取樣+剩余等）/理論產(chǎn)出量×100%

應(yīng)當(dāng)至少要求從關(guān)鍵原料到成品環(huán)節(jié)計(jì)算物料平衡；應(yīng)當(dāng)有對物料平衡可接受標(biāo)準(zhǔn)的要求；應(yīng)明確物料平衡超出可接受標(biāo)準(zhǔn)的處理方法。

（四）應(yīng)當(dāng)建立清場的管理規(guī)定。前一道工藝結(jié)束后或前一種產(chǎn)品生產(chǎn)結(jié)束后必須進(jìn)行清場，確認(rèn)合格后才可以入場進(jìn)行其他生產(chǎn)，并保存清場記錄。

（五）清場時，配制和分裝器具等應(yīng)當(dāng)進(jìn)行清洗、干燥等潔凈處理，并進(jìn)行驗(yàn)證，必要時，器具清洗干燥后應(yīng)當(dāng)有有效保存時間的驗(yàn)證。

（六）應(yīng)當(dāng)建立生產(chǎn)用菌毒種的原始種子批、主代種子批和工作種子批系統(tǒng)。生產(chǎn)和檢驗(yàn)用的菌毒種應(yīng)當(dāng)標(biāo)明來源，驗(yàn)收、儲存、保管、使用、銷毀應(yīng)當(dāng)執(zhí)行《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》。

（七）生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)當(dāng)建立原始細(xì)胞庫、主代細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫。應(yīng)當(dāng)建立細(xì)胞庫檔案資料和細(xì)胞操作日志。自行制備抗原或抗體，應(yīng)當(dāng)對所用原料的來源和性質(zhì)有詳細(xì)的記錄并可追溯。

（八）應(yīng)當(dāng)制定批號管理制度，對主要物料、中間品和成品按規(guī)定進(jìn)行批號管理，并保存和提供可追溯的記錄。同一試劑盒內(nèi)各組分批號不同時應(yīng)當(dāng)盡量將生產(chǎn)日期接近的組分進(jìn)行組合，在每個組分的標(biāo)簽上均標(biāo)明各自的批號和有效期。整個試劑盒的有效期應(yīng)當(dāng)以最先到有效期的組分的效期為準(zhǔn)。

五、產(chǎn)品檢驗(yàn)與質(zhì)量控制要求

（一）使用一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、二級校準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)當(dāng)能夠?qū)α恐颠M(jìn)行溯源，明確其來源、準(zhǔn)確度及不確定度。

1．標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了的特性，用以校準(zhǔn)測量裝置、評價(jià)測量方法或給材料賦值的一種材料或物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)為經(jīng)國家批準(zhǔn)的參考物質(zhì)。

2．標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分級：

（1）一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

1）用絕對測量法或兩種以上不同原理的準(zhǔn)確可靠的方法定值。在只有一種定值方法的情況下，用多個實(shí)驗(yàn)室以同種準(zhǔn)確可靠的方法定值；

2）準(zhǔn)確度具有國內(nèi)最高水平，均勻性在準(zhǔn)確度范圍之內(nèi)；

3）穩(wěn)定性在一年以上或達(dá)到國際上同類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的先進(jìn)水平；

4）包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范的要求。

（2）二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

1）用與一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較測量的方法或一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法定值；

2）準(zhǔn)確度和均勻性未達(dá)到一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的水平，但能滿足一般測量的需要；

3）穩(wěn)定性在半年以上，或能滿足實(shí)際測量的需要；

4）包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范的要求。

（二）應(yīng)當(dāng)建立校準(zhǔn)品、參考品量值溯源程序。對每批生產(chǎn)的校準(zhǔn)品、參考品進(jìn)行賦值。應(yīng)當(dāng)能提供外購的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的來源和溯源性的相關(guān)證明。應(yīng)當(dāng)對檢驗(yàn)過程中使用的標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品建立臺賬及使用記錄。應(yīng)當(dāng)記錄其來源、批號、效期、溯源途徑、主要技術(shù)指標(biāo)、保存狀態(tài)等信息，按照規(guī)定進(jìn)行復(fù)驗(yàn)并保存記錄。

（三）對不具備檢測能力的外購物料，企業(yè)應(yīng)當(dāng)制定驗(yàn)收規(guī)程。

（四）需要常規(guī)控制的檢驗(yàn)項(xiàng)目原則上不得進(jìn)行委托檢驗(yàn)，確需委托檢驗(yàn)的，受托方應(yīng)當(dāng)具備相應(yīng)的資質(zhì)條件，企業(yè)應(yīng)當(dāng)有委托檢驗(yàn)協(xié)議，協(xié)議內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括委托檢驗(yàn)的數(shù)量、周期、項(xiàng)目要求；并保存檢驗(yàn)報(bào)告和驗(yàn)收記錄。

（五）如試樣，企業(yè)應(yīng)當(dāng)有試樣驗(yàn)證的驗(yàn)收規(guī)程和記錄，并保存試樣批號、試樣生產(chǎn)記錄、檢測報(bào)告、操作人員簽字、批準(zhǔn)人員簽字等相關(guān)記錄。

（六）留樣應(yīng)當(dāng)在規(guī)定條件下儲存。應(yīng)當(dāng)建立留樣臺賬，及時記錄留樣檢驗(yàn)信息，留樣檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)當(dāng)注明留樣批號、效期、檢驗(yàn)日期、檢驗(yàn)人、檢驗(yàn)結(jié)果等。留樣期滿后應(yīng)當(dāng)對留樣檢驗(yàn)報(bào)告進(jìn)行匯總、分析并歸檔。

注：對于與質(zhì)量管理體系有關(guān)的要求已單獨(dú)制定檢查指南的，可參照相應(yīng)檢查指南執(zhí)行。

 

附件：1. 常見的體外診斷試劑的生產(chǎn)、檢驗(yàn)設(shè)備清單

2. 化學(xué)發(fā)光法主要生產(chǎn)工藝

3. 膠體金法主要生產(chǎn)工藝

4. 酶聯(lián)產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝

5. 生化試劑主要生產(chǎn)工藝

6. 常見的人血基質(zhì)質(zhì)控品生產(chǎn)工藝

 

附件1 

常見的體外診斷試劑的生產(chǎn)、檢驗(yàn)設(shè)備清單

化學(xué)發(fā)光試劑：

生產(chǎn)設(shè)備：天平、離心機(jī)、配液桶、燒杯、吸管、量筒、蠕動泵、分裝機(jī)、包被機(jī)、洗板機(jī)、除濕機(jī)、干燥箱、分裝機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等

檢測設(shè)備：PH計(jì)、電導(dǎo)率儀、發(fā)光分析儀、洗板機(jī)、恒溫箱

膠體金試劑：

生產(chǎn)設(shè)備：天平、離心機(jī)、噴膜機(jī)、噴金機(jī)、加熱攪拌設(shè)備、除濕機(jī)、干燥箱、切條機(jī)、壓卡機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、包裝機(jī)、冰箱等

檢測設(shè)備：PH計(jì)、紫外分光光度計(jì)、卡尺、膠體金讀數(shù)儀、電泳儀

酶聯(lián)免疫試劑：

生產(chǎn)設(shè)備：天平、離心機(jī)、配液桶、磁力攪拌器、燒杯、吸管、量筒、蠕動泵、分裝機(jī)、包被機(jī)、洗板機(jī)、甩干機(jī)或吸液機(jī)、除濕機(jī)、干燥箱、恒溫箱、分裝機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等

檢測設(shè)備：PH計(jì)、電導(dǎo)率儀、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫箱、電泳儀、紫外分光光度計(jì)、天平

生化試劑：

生產(chǎn)設(shè)備：天平、配液桶、燒杯、吸管、量筒、容量瓶、移液器、攪拌器、蠕動泵、分裝機(jī)、凍干機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等

檢測設(shè)備：PH計(jì)、電導(dǎo)率儀、生化分析儀、分光光度計(jì)、水分滴定儀

附件2

化學(xué)發(fā)光法主要生產(chǎn)工藝

一、原理

化學(xué)發(fā)光免疫分析（chemiluminescence immunoassay，CLIA），是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。化學(xué)發(fā)光免疫分析包含兩個部分，即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)（在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體）直接標(biāo)記在抗原或抗體上，或酶作用于發(fā)光底物?；瘜W(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發(fā)態(tài)的中間體，當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時，同時發(fā)射出光子，利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額，該光量子產(chǎn)額與樣品中的待測物質(zhì)的量成正比，由此可以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算樣品中待測物質(zhì)的含量。

二、化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型

（一）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析

化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA），是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物（AE）。

（二）化學(xué)發(fā)光酶免疫分析

從標(biāo)記免疫分析角度，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（CLEIA），應(yīng)屬酶免疫分析，只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑，操作步驟與酶免分析完全相同：以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)（如酶標(biāo)記的抗原或抗體）進(jìn)行免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物，在信號試劑作用下發(fā)光，用發(fā)光儀進(jìn)行發(fā)光測定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP），它們有各自的發(fā)光底物。

（三）時間分辨熒光免疫分析（TRFIA）

是用三價(jià)稀土離子及其螯合劑作為示蹤物，如銪（Eu3+）、鋱（Te3+）及釤（Sm3+）、鏑（De3+）等代替?zhèn)鹘y(tǒng)的熒光物質(zhì)、放射性同位素、酶和化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，來標(biāo)記抗體、抗原、多肽、激素、核酸探針或生物活性細(xì)胞，待反應(yīng)體系發(fā)生后，用時間分辨熒光儀測定最后產(chǎn)物中的熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度和相對熒光強(qiáng)度比值，判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度，達(dá)到定量分析的目的。

（四）電化學(xué)發(fā)光免疫分析（ECLIA）

是電化學(xué)發(fā)光（ECL）和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物，是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光二個過程。ECL 反應(yīng)底物有兩種：三氯聯(lián)吡啶釕[Ru（bpy）3]2+、絡(luò)合物三丙胺（TPA）。

三、主要生產(chǎn)工藝（以微孔板載體的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析為例進(jìn)行描述）

（一）固相載體的制備

1．包被板的準(zhǔn)備

準(zhǔn)備經(jīng)檢驗(yàn)合格的包被板，記錄批號、數(shù)目、狀態(tài)標(biāo)識。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：尺寸，外觀，包裝。

2．包被液的配制

配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原至工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)使用。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：包被緩沖液配方，pH值。

3．包被板的包被

包被液按工藝要求加入包被板。記錄所包被的包被板數(shù)量。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：包被體積，溫度，時間，過程監(jiān)控。

關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、天平、加樣器。

4．洗板工作液的配制（按各單位工藝要求，可以不洗板）

按配方配制洗板工作液。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：洗板工作液配方，pH值。

5．封閉液的配制

按配方配制封閉液。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：封閉液配方，pH值。

6．洗板和封閉

包被完成后，抽去孔內(nèi)包被液，用洗板工作液洗板后（按各單位工藝要求，可以不洗板），加入封閉液。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：封閉體積，溫度，時間，過程監(jiān)控。

關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、洗板機(jī)、天平、加樣器。

7．抽干

封閉后的反應(yīng)板，抽干孔內(nèi)液體。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：過程監(jiān)控。

8．干燥

反應(yīng)板應(yīng)按工藝的要求進(jìn)行干燥。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：溫度，濕度，時間，過程監(jiān)控等。

9．密封包裝

將干燥后的反應(yīng)板用鋁箔袋密封包裝，內(nèi)放干燥劑（按各單位工藝要求，可以不放）。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：密封性能，標(biāo)識及效期等。

關(guān)鍵設(shè)備：包裝機(jī)。

10．反應(yīng)板（半成品）檢驗(yàn)

對裝袋密封后的反應(yīng)板進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：外觀、板內(nèi)變異、板間變異等。

（二）滴配過程

1．酶結(jié)合物（也稱酶標(biāo)記物）的制備（根據(jù)各產(chǎn)品實(shí)際情況，該步驟可不進(jìn)行）

采用常規(guī)過碘酸鈉——乙二醇法將相關(guān)的抗體（或抗原）標(biāo)記辣根過氧化物酶（或其他酶），酶標(biāo)記后的抗體（或抗原）應(yīng)加入適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑保存于低溫。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：標(biāo)記方法，過程控制。

2．酶結(jié)合物的鑒定

（1）功能性實(shí)驗(yàn)

將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋后，用于產(chǎn)品的滴配，其結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

（2）穩(wěn)定性

將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋，進(jìn)行2～8℃，及熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，滴配結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3．酶結(jié)合物稀釋液

按酶結(jié)合物稀釋液的配方配制，存放在2～8℃保存，并于規(guī)定時間內(nèi)使用。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：酶結(jié)合物稀釋液配方，pH值。

4．酶結(jié)合物工作濃度的滴配

取酶結(jié)合物，用酶結(jié)合物稀釋液稀釋到不同的濃度，用已制備好的反應(yīng)板進(jìn)行滴配。測定系列標(biāo)準(zhǔn)品及相應(yīng)的質(zhì)控品，確定使體系達(dá)到最優(yōu)的酶結(jié)合物工作濃度。

5．酶結(jié)合物工作液配制

將所需量酶結(jié)合物和酶結(jié)合物稀釋液按滴配濃度混合均勻。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，用配套的反應(yīng)板進(jìn)行檢驗(yàn)，外觀、靈敏度、質(zhì)控品測定值、定量產(chǎn)品應(yīng)作校準(zhǔn)品線性檢測。

6．酶結(jié)合物工作液的分裝

按工藝要求分裝酶結(jié)合物工作液。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。

7．酶結(jié)合物工作液（半成品）檢驗(yàn)

對分裝后的酶結(jié)合物工作液進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、靈敏度、校準(zhǔn)品劑量-反應(yīng)曲線線性、質(zhì)控品測定值。

（三）校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的制備

1．稀釋液

按稀釋液的配方配制，存放在2～8℃或-20℃以下保存，并于有效期內(nèi)使用。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：稀釋液配方，pH值。

2．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照的配制

校準(zhǔn)品、陰/陽性對照品的配制應(yīng)具有量值溯源性，可參照國家標(biāo)準(zhǔn)品、WHO標(biāo)準(zhǔn)品或其他級別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行配制。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值。

3．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的分裝

按工藝要求分裝校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量。

4．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品（半成品）檢驗(yàn)

對分裝后的校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值。

（四）化學(xué)發(fā)光底物的制備

1．底物緩沖液

按底物緩沖液的配方配制，存放在2～8℃保存，并于有效期內(nèi)使用。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：底物緩沖液配方，pH值。 

2．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的配制

分別按氧化劑和發(fā)光劑的配方在底物緩沖液中加入相應(yīng)的氧化劑和發(fā)光劑。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：氧化劑和發(fā)光劑配方。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，本底、發(fā)光強(qiáng)度。

3．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的分裝

按工藝要求分裝化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。

4．化學(xué)發(fā)光底物（半成品）檢驗(yàn)

對分裝后的化學(xué)發(fā)光底物進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、本底、靈敏度、發(fā)光強(qiáng)度。

（五）分裝、目檢和貼簽

分裝量用減重稱量法進(jìn)行測量，把質(zhì)量換算成體積后進(jìn)行分裝量的控制。目檢是目測檢查各組分的色澤、分裝量以及是否混濁、有雜質(zhì)等。

（六）包裝

根據(jù)試劑盒包裝SOP要求及說明書的要求，以流水線操作形式進(jìn)行包裝。包裝時應(yīng)嚴(yán)格檢查品名、批號、裝量，認(rèn)真核對各物料數(shù)量，并在關(guān)盒前進(jìn)行復(fù)核。

附件3

膠體金法主要生產(chǎn)工藝

一、原理

免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，稱為膠體金。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。膠體金類試劑是采用膠體金標(biāo)記的抗體或抗原包被于玻璃纖維膜、聚酯膜或其他載體，將相關(guān)抗原或抗體固相連接在硝酸纖維膜，應(yīng)用層析法的原理檢測樣品中的抗原或抗體的快速檢測試劑。

二、主要生產(chǎn)工藝

（一）膠體金的制備

采用枸櫞酸三鈉還原法或其他方法制備膠體金，膠體金顆粒大小應(yīng)符合規(guī)定，膠體金標(biāo)記物在510～560nm波長處應(yīng)有最大吸收值，置2～8℃保存，應(yīng)在規(guī)定的保存期內(nèi)使用。用枸櫞酸三鈉還原法生產(chǎn)膠體金，金顆粒大小受用量、煮沸時機(jī)等因素影響。改變這些因素便可生產(chǎn)出不同顆粒大小的膠體金。

膠體金的檢查指標(biāo)有顆粒的大小，粒徑的均一程度和濃度，可以通過肉眼觀察，但需要一定的經(jīng)驗(yàn)，良好的膠體金應(yīng)該是清亮透明的。

所用設(shè)備：加熱攪拌設(shè)備。

（二）膠體金的標(biāo)記以及濃度的確定

膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值，在接近蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)或偏堿的條件下，二者容易形成牢固的結(jié)合物。如果膠體金的pH值低于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)時，則會聚集而失去結(jié)合能力。除此以外膠體金顆粒的大小、離子強(qiáng)度、蛋白質(zhì)的分子量等都影響膠體金與蛋白質(zhì)的結(jié)合。

（三）檢測線及質(zhì)控線的制備

取已確定使用濃度的相關(guān)抗原或抗體，在硝酸纖維素膜上制備檢測線，應(yīng)用同樣方法制備質(zhì)控線，根據(jù)生產(chǎn)工藝在規(guī)定的溫度、濕度條件下干燥，在規(guī)定的濕度（通過驗(yàn)證方法確定相對濕度要求）條件下存放。檢測線與質(zhì)控線應(yīng)具有間隔距離要求，應(yīng)對所用的金標(biāo)用玻璃纖維、硝酸纖維素膜、塑料卡等進(jìn)行質(zhì)量檢測，如尺寸、外觀、包裝及性能等，并記錄批號、規(guī)格、數(shù)目、標(biāo)識。不同規(guī)格的玻璃纖維、硝酸纖維素膜及塑料卡不能混用。

（四）貼膜、切割、裝卡、裝袋

貼膜、切割、裝卡、裝袋應(yīng)在具有相應(yīng)溫濕度（通過驗(yàn)證方法確定相對溫濕度要求）條件下操作，切割的膜條應(yīng)有寬度要求。

附件4

酶聯(lián)產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝

一、原理

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay）的簡稱。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原-抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

二、主要生產(chǎn)工藝

（一）酶標(biāo)板的制備：

1．工藝流程

 

2．關(guān)鍵點(diǎn)控制

（1）包被：

1）確認(rèn)包被液的相關(guān)信息（名稱、濃度、批號、批量等）；

2）包被液量控制在要求范圍內(nèi)；

3）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。

關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、天平、加樣器。

（2）封閉：

1）確認(rèn)洗板的次數(shù)（如有洗板）；

2）確認(rèn)配制封閉液的相關(guān)信息（名稱、濃度、批號、批量等）；

3）封閉液量控制在要求范圍內(nèi)；

4）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。

關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、洗板機(jī)、天平、加樣器。

（3）干燥、包裝：

1）干燥的溫濕度在要求范圍內(nèi)；

2）干燥結(jié)束的酶標(biāo)板逐一裝入鋁箔袋中同時放入一袋干燥劑，裝袋同時要將酶標(biāo)板標(biāo)識不清楚的、板孔有缺損的挑出報(bào)廢。

關(guān)鍵設(shè)備：包裝機(jī)。

（二）酶標(biāo)試劑的制備：

1．工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2．關(guān)鍵點(diǎn)控制

（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（2）確認(rèn)配制溶液的外觀符合要求；

（3）確認(rèn)配制試劑的相關(guān)信息（名稱、濃度、批號、批量等）；

（4）控制液體分裝量范圍，應(yīng)滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備：天平、分裝機(jī)。

（三）陰、陽性對照的制備：

1．工藝流程

（A）原料的滅活（如需）→（B）液體的配制→（C）液體的分裝

2．關(guān)鍵點(diǎn)控制

（1）控制滅活溫度和時間（如滅活）；

（2）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（3）確認(rèn)配制陰陽性對照的相關(guān)信息（名稱、濃度、批號、批量等）；

（4） 控制液體分裝量范圍，應(yīng)滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備：水浴鍋（如滅活）、天平、分裝機(jī)。

（四）其他組分的制備：

1．工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2．關(guān)鍵點(diǎn)控制

（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（2）確認(rèn)配制試劑的相關(guān)信息（名稱、批號、批量等）；

（3）控制液體分裝量范圍，應(yīng)滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備：天平、分裝機(jī)。

附件5

生化試劑主要生產(chǎn)工藝

一、常見生產(chǎn)流程

容器清洗——稱量（關(guān)鍵工序）——溶解、配制（過濾）——半成品檢驗(yàn)——分裝——如有凍干（特殊工序）——打印批號、貼標(biāo)、包裝、裝盒——成品檢驗(yàn) 

二、操作規(guī)程及質(zhì)量控制點(diǎn)

（一）主要原材料

與產(chǎn)品質(zhì)量密切相關(guān)的主要原材料包括各種酶制劑、化學(xué)試劑、抗原、抗體等。主要原料的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目一般包括：

1.外觀

2.含量（化學(xué)試劑）：根據(jù)國家、國際標(biāo)準(zhǔn)或本企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)量要求一般為分析純以上。

3.酶活性（酶制劑）：根據(jù)通用標(biāo)準(zhǔn)或本企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。

4.抗體效價(jià)：通過倍比稀釋法與抗原反應(yīng)進(jìn)行檢測（建議通過配制試樣檢測到貨產(chǎn)品質(zhì)量）。

（二）其它

1.包裝瓶

質(zhì)量要求：外觀、密封性、抗跌性、溶出物、脫色試驗(yàn)、振蕩試驗(yàn)。

2.說明書、包裝外盒、瓶簽等標(biāo)識

參照國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》和《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》。

（三）試劑盒生產(chǎn)的關(guān)鍵步驟及質(zhì)控項(xiàng)目

試劑的生產(chǎn)包括試劑的制水、配制、過濾、凍干（凍干試劑）、分包裝等步驟；并通過產(chǎn)品的半成品檢驗(yàn)和成品檢驗(yàn)兩個質(zhì)控過程來保證其質(zhì)量符合相關(guān)規(guī)定。

1.制水

使用水處理設(shè)備進(jìn)行工藝用水的制備，并經(jīng)過專用管路連接到各用水點(diǎn)。

2.容器清洗

（1）用水清潔配制所需容器。

（2）質(zhì)控要求：清潔無污漬。

（3）容器的清洗要按驗(yàn)證方案進(jìn)行；應(yīng)有對清洗用水的要求；

（4）如有對容器清洗后干燥的要求，應(yīng)有干燥過程參數(shù)的驗(yàn)證報(bào)告。

3.稱量

（1）稱量前天平應(yīng)調(diào)節(jié)水平并經(jīng)校準(zhǔn)，稱量時應(yīng)雙人復(fù)核，應(yīng)有天平調(diào)零過程；

（2）天平精度應(yīng)至少高于所稱量物品最小精度的一個數(shù)量級；

4.配制

（1）應(yīng)有攪拌方法的要求：如用攪拌機(jī)應(yīng)有速率及時間的要求，如人工攪拌應(yīng)有攪拌圈數(shù)的要求；

（2）配制間溫度一般應(yīng)控制在18～25℃，配制、過濾時間一般不超過4小時。

5.過濾（如有）

根據(jù)各產(chǎn)品的規(guī)程選擇不同的濾膜進(jìn)行過濾，確保溶液無雜質(zhì)、空白吸光度符合要求。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：試劑外觀、空白吸光度（通過后續(xù)的半成品檢驗(yàn)完成）。

6.分裝

（1）按工藝要求試劑分裝。分裝前、分裝中、分裝末均需對分裝量進(jìn)行校驗(yàn)。

常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量、分裝量、封裝后密封性。

（2）應(yīng)有試分裝的要求，或首瓶檢測的要求；

7.凍干

（1）使用凍干機(jī)對試劑進(jìn)行凍干。各種凍干試劑都需建立相應(yīng)的凍干工藝，凍干過程的重要參數(shù)主要為凍干時間、凍干壓力、凍干溫度。

（2）凍干品外觀應(yīng)該呈現(xiàn)疏松的粉末狀固體，在規(guī)定時間內(nèi)（一般不超過60分鐘）復(fù)溶完全。

（3）凍干過程一般為：預(yù)凍（降溫）——抽真空——化霜[加熱升溫（逐漸）]

8.包裝

將試劑各組分、合格證及說明書，放入相應(yīng)的試劑盒內(nèi)。包裝時應(yīng)檢查品名、批號、失效期、裝量、規(guī)格，核對各物料數(shù)量，并在蓋盒前進(jìn)行復(fù)核。

9.封膜

將組裝好的試劑放在自動封膜機(jī)上封裝，控制封膜時間以及封膜的溫度。確保膜完整及與試劑盒吸附緊密。

附件6

常見的人血基質(zhì)質(zhì)控品生產(chǎn)工藝 

一、血清/血漿基質(zhì)加生物活性物質(zhì)方法（適用于定值質(zhì)控）

質(zhì)控點(diǎn)：確定分裝、凍干后質(zhì)控品的濃度、瓶間變異、穩(wěn)定性等

 

二、混合血清/血漿方法（適用于定性質(zhì)控）

質(zhì)控點(diǎn)1：確定混合后血清、血漿的陰陽性

質(zhì)控點(diǎn)2：確定分裝、凍干后質(zhì)控品的陰陽性、瓶間變異、穩(wěn)定性等