來源:燈塔光免小助手
產品性能評估是產品研發(fā)、制定產品標準等過程的重要技術支持研究過程,并可能對產品的質量造成一定的影響。
目前國際上對體外診斷試劑的性能評估通常是以美國臨床實驗室標準化組織(Clinical and Laboratory Standards Institude以下稱為CLSI)的相關標準為依據(jù),也是美國FDA推薦采用的評價標準。
美國臨床和實驗室標準協(xié)會
性能評價的標準
體外診斷試劑產品性能評估包括檢測限、線性范圍、可報告范圍、準確度(回收實驗)、準確度(方法學比較)、精密度、干擾實驗、穩(wěn)定性、參考區(qū)間共九個項目。
Trueness / Comparability (準確度)
Precision (精密度)
Linearity (線性)
EP06-A, Evaluation of the Linearity ofQuantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; ApprovedGuideline.
Limit of Detection / Quantitation (檢測限)
EP17-A, Protocols for Determination ofLimits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline.
Reference Interval (參考區(qū)間)
EP28-A3C, Definingand Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; ApprovedGuideline—Third Edition.
Qualitative Comparability (定性可比性)
EP12-A2, User Protocol for Evaluation ofQualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.
Diagnostic Accuracy (診斷準確性)
EP12-A2, User Protocol for Evaluationof Qualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.
Qualitative Precision (定性精密度)
EP12-A2, User Protocol for Evaluationof Qualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.
檢測限( EP17-A )
概述
檢測限評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據(jù),也是產品注冊所需的重要申報資料之一。
空白限值: Limit of Blank( LoB )
檢出限值:Limit of Detection (LoD)
定量限值: Limit of Quantitation (LoQ)
各種限值之間的關系
?
建立和驗證LoB測量程序
LoB=μB + 1.645σB
注:μB即平均值,σB即SD
LoB=μB + 1.645σB (1)
注:μB即平均值,σB即SD
LoB=PctB 100-α (2)
樣本選擇
建立和驗證LoD測量程序
Ø若低水平樣品檢測結果呈正態(tài)分布,其分布的5%(β)百分位數(shù)相當于LoB:
LoB=μS - 1.645σS 注:μs即平均值,σs即SD
即μS =LoD=LoB +1.645σS ,從而
LoD=μB + 1.645σB + 1.645σS
LoDtent=LoB +cβSDS (6)
注:cβ=1.645/(1-1/(4*f));f =Ns-K,即自由度
LoD=LoB + D S,β (7)
注:D S,β 類似cβ,根據(jù)β誤差范圍劃分,一般取95%的數(shù)據(jù)>LoB為置信范圍。
舉例說明(某產品為例)
產品標準 |
性能考核LOB |
性能考核LOD |
不高于1.5U/ml |
1.5U/ml |
0.8U/ml(112%) |
1.2U/ml(50%) |
||
1.6U/ml(55%) |
?
?
線性范圍
概述
基本要求
實驗過程
結果處理
舉例說明(CA125)
產品標準 |
性能考核 |
|
范圍 |
1.5U/mL~5000U/mL |
1.05U/ml~6500U/mL |
評估資料 |
性能考核 |
|||
CA125-L7 |
定標品稀釋液 |
L1 |
L6 |
|
L1 |
0.1% |
99.9% |
100% |
0% |
L2 |
0.5% |
99.5% |
80% |
20% |
L3 |
5.0% |
95% |
60% |
40% |
L4 |
15% |
85% |
40% |
60% |
L5 |
30% |
70% |
20% |
80% |
L6 |
60% |
40% |
0% |
100% |
?
?
檢測值 |
理論值 |
偏差 |
產品標準 |
是否通過 |
6.61 |
-17.97 |
-24.58 |
不超過±30U/mL |
是 |
778.9 |
883.3 |
-13.4% |
不超過±15% |
是 |
2135 |
2146.3 |
-0.53% |
不超過±15% |
是 |
3167 |
3309.3 |
-4.30% |
不超過±15% |
是 |
4679 |
4472 |
4.62% |
不超過±15% |
是 |
5602 |
||||
線性相關系數(shù)r=0.9967 |
線性相關系數(shù)r ≥0.99 |
是 |
準確度
概述
準確度評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據(jù),也是產品注冊所需的重要申報資料之一。定量檢測方法的回收實驗是評估準確度的方法之一,用于評估定量檢測方法準確測定加入純分析物的能力,結果用回收率表示。
評價依據(jù)
實驗過程
?
?
準確度(CEA)
回收率 |
產品標準 |
||
回收A |
90.39 |
108% |
85%~115% |
回收B |
2.55 |
||
回收C |
13.85 |
測值 |
定值 |
偏差 |
|
WHO-1 |
10.12 |
10 |
1.20% |
WHO-2 |
100.1 |
100 |
0.07% |
精密度
概述
實驗過程
注意問題
精密度(CEA)
?
?
?
?
產品標準 |
性能考核L |
性能考核M |
性能考核H |
CV不大于8% |
4.5% |
4.8% |
3.4% |
M樣本由L和H同體積混合而成 |
干擾實驗
概述
干擾物質是體外診斷試劑使用過程中造成測量誤差的一個主要原因,針對體外診斷試劑進行的干擾實驗是指通過實驗查找出對體外診斷試劑測量結果產生影響的物質的過程。干擾實驗評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據(jù),也是產品注冊所需的重要申報資料之一
干擾物質來源
干擾實驗的評估
干擾物質對實驗結果的影響,一般是通過測定對照或基礎樣本池中待測物的濃度計算得出的。在某些情況下,對照樣本池中可能含有一定量的內源性干擾物質,如膽紅素、血紅蛋白、蛋白質和脂類。在一些測量程序中,采用標本前處理、樣本空白、血清基質校正物和因子校正等手段以減少這些干擾物質在平均濃度下的影響,只有當患者樣本中干擾物質濃度高于或低于平均水平時,由于干擾物質引起的誤差才會顯現(xiàn)出來。
基于此,有兩種評估干擾物質的基本方法,每一種方法都有它的優(yōu)點及內在局限性,當兩種方法同時使用時,可提供相互補充的信息。一種方法是將可疑干擾物質加入樣本以評價干擾效果,另一種方法是測量個別有代表性病人標本,相對于高特異性可比較的測量程序評價被分析測量程序產生的偏倚。
實驗準備
膽紅素(濃度) |
血紅蛋白(濃度) |
||
評估資料 |
性能考核 |
評估資料 |
性能考核 |
0 |
0 |
0 |
0 |
150 |
400 |
250 |
800 |
300 |
600 |
500 |
1000 |
450 |
800 |
750 |
1200 |
600 |
1000 |
乳糜顆粒(%) |
RF(濃度) |
||
評估資料 |
性能考核 |
評估資料 |
性能考核 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.25 |
1.00 |
500 |
800 |
0.50 |
2.00 |
1000 |
1000 |
1.00 |
3.00 |
1200 |
|
2.00 |
ANA(滴度) |
|
評估資料 |
性能考核 |
0 |
0 |
80 |
120 |
160 |
140 |
160 |
樣品名稱 |
終濃度 |
濃度值 |
偏差 |
膽紅素Ser-L1 |
0 |
10.52 |
/ |
膽紅素Ser-L2 |
400 |
12.23 |
16.24% |
膽紅素Ser-L3 |
600 |
11.46 |
8.87% |
膽紅素Ser-L4 |
800 |
11.33 |
7.69% |
膽紅素Ser-H1 |
0 |
91.77 |
/ |
膽紅素Ser-H2 |
400 |
105.2 |
14.61% |
膽紅素Ser-H3 |
600 |
99.84 |
8.79% |
膽紅素Ser-H4 |
800 |
100.4 |
9.44% |
結論
性能關乎著產品的質量,做好性能評估對于研發(fā)一個好產品來說至關重要!